Medios De Cultivo Que Requieren Su Esterilización Por Filtración

Cuando hablamos de medios de cultivo, nos referimos a sustancias que nutren a microorganismos como bacterias y hongos para que crezcan en el laboratorio. Algunos de estos medios, por su composición, no pueden esterilizarse con calor (autoclave) porque sus componentes se dañarían. Para estos casos, usamos la esterilización por filtración. Este método remueve microorganismos en lugar de matarlos con calor.

¿Qué Medios Necesitan Filtración?

Aquellos medios que contienen componentes termolábiles (sensibles al calor) requieren filtración. Algunos ejemplos comunes son:

• Vitaminas: Muchas vitaminas se degradan a altas temperaturas.
• Antibióticos: Algunos antibióticos pierden su efectividad con el calor.
• Suero fetal bovino (SFB): Este suplemento, crucial para el crecimiento de células animales, se daña con el calor.
• Algunos azúcares: Como la glucosa o la fructosa, que pueden caramelizarse al ser sometidos a altas temperaturas.

El Proceso de Esterilización por Filtración: Paso a Paso

El proceso es relativamente sencillo, pero crucial para evitar la contaminación:

1. Preparación del medio: Se prepara el medio de cultivo según la receta, disolviendo los ingredientes en agua destilada. Importante: No esterilizar aún!
2. Selección del filtro: Se utiliza un filtro con poros muy pequeños, generalmente de 0.22 micrómetros (µm). Este tamaño de poro es suficientemente pequeño para retener bacterias y hongos comunes.
3. Montaje del sistema de filtración: El filtro se coloca en un soporte (por ejemplo, una jeringa con un filtro acoplado, o un embudo con un filtro de membrana). Todo el sistema debe estar previamente esterilizado, usualmente en autoclave si los materiales lo permiten.
4. Filtración: Se hace pasar el medio de cultivo a través del filtro. Se puede usar presión positiva (empujando con una jeringa) o presión negativa (usando una bomba de vacío).
5. Recolección aséptica: El medio filtrado se recoge en un recipiente estéril. Es crucial trabajar bajo una campana de flujo laminar para evitar la contaminación durante este paso.
6. Almacenamiento: El medio estéril se almacena en condiciones adecuadas para evitar el crecimiento de microorganismos (generalmente refrigeración).

¿Por qué es importante la esterilización por filtración?

Si utilizáramos autoclave en estos medios sensibles al calor, los componentes esenciales se degradarían, y el medio sería inútil. La filtración asegura que el medio sea estéril (libre de microorganismos) sin alterar su composición química.

Ejemplo Práctico

Imagina que necesitas cultivar células animales. El medio de cultivo lleva suero fetal bovino (SFB). Si lo autoclavas, el SFB se destruye, y las células no crecerán. La solución: esterilizar el medio por filtración después de añadir el SFB.

En resumen, la esterilización por filtración es una técnica esencial para preparar medios de cultivo que contienen componentes sensibles al calor, garantizando un ambiente estéril para el crecimiento de microorganismos o células, sin dañar los ingredientes vitales del medio.