Metodo De Separacion De Mezclas Cromatografia En Papel
La cromatografía en papel es un método de separación de mezclas que se basa en la diferencia de afinidad de los componentes de la mezcla por dos fases: una fase estacionaria (el papel) y una fase móvil (el solvente). En esencia, separa sustancias según su solubilidad y adhesión relativa al papel.
El proceso se realiza por pasos:
- Preparación: Se necesita papel de filtro especial para cromatografía, un solvente adecuado (por ejemplo, agua, alcohol o una mezcla de ambos), y la muestra a separar. Ejemplo: Se quiere separar los pigmentos de una hoja verde.
- Aplicación de la muestra: Se aplica una pequeña cantidad de la muestra (unos pocos microlitros) en un punto del papel, a cierta distancia del borde inferior. Es crucial que la muestra esté concentrada. Ejemplo: Se extrae el pigmento de la hoja con un solvente y se deposita una pequeña gota en el papel.
- Desarrollo de la cromatografía: Se introduce el papel en un recipiente que contiene el solvente, asegurándose de que el punto de aplicación de la muestra esté por encima del nivel del líquido. El solvente ascenderá por el papel por capilaridad. Ejemplo: El solvente, una mezcla de alcohol y agua, sube por el papel arrastrando consigo los pigmentos.
- Separación: A medida que el solvente asciende, los componentes de la mezcla se separan. Aquellos más solubles en el solvente y menos adheridos al papel viajarán más lejos. Ejemplo: La clorofila, más soluble en el solvente, ascenderá más que otros pigmentos menos solubles.
- Visualización y análisis: Una vez que el solvente haya ascendido una distancia considerable, se retira el papel y se deja secar. Las manchas coloreadas representan los diferentes componentes separados. Se puede calcular el Factor de Retención (Rf) para identificar las sustancias. Ejemplo: Se observan bandas de diferentes colores, cada una representando un pigmento diferente (clorofila a, clorofila b, carotenoides, etc.).
La cromatografía en papel es fundamental en bioquímica para separar aminoácidos, azúcares y otros compuestos biológicos. También se utiliza en química forense para identificar tintas en documentos falsificados. Su simplicidad y bajo costo la convierten en una técnica valiosa en muchos campos.
